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非凍型組織RNA保存液(RNAwait)產(chǎn)品特點

1．操作簡單，將組織剪薄浸沒在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。

2．替代液氮，使樣品的保存不需液氮，干冰或-80℃冰箱，尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。

3．RNA完整，因RNAwait能迅速抑制組織中RNA酶的活性，故從中提取的RNA的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比不相上下。

4．方便運輸，處理過的樣品能在25℃保存一周，使樣品郵寄和運輸變得容易和便宜，有利學(xué)術(shù)合作和交流。

5．反復(fù)凍融，經(jīng)RNAwait處理的樣品可反復(fù)凍融20次，其間可對樣品進(jìn)行各種處理而不影響最終提取的RNA的質(zhì)量。

6．結(jié)果準(zhǔn)確，RNAwait進(jìn)入細(xì)胞十分快速，基因表達(dá)在發(fā)生應(yīng)急改變前就得以鎖定，故RNA分析更能反映取樣時的真實情況。

7．可比性強，RNAwait能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差，增加各次實驗數(shù)據(jù)間的可比性，對大規(guī)模基因表達(dá)譜的分析尤其有用。

8．兼容性廣，處理過的樣品可以使用TRIzol 等試劑提取其RNA，樣品還可直接用于組織切片，免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析而不影響RNA的質(zhì)量。

非凍型組織RNA保存液(RNAwait)技術(shù)指標(biāo)

37℃                            一天(保存三天的樣品RNA有部分降解)

18-25℃                       一周(保存兩周的樣品RNA有輕微降解)

2-8℃                           一個月

-20℃和-80℃               長期

非凍型組織RNA保存液(RNAwait)操作流程：

1．  根據(jù)要保存的各樣本的體積，計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×107細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是：量寧多勿少。建議在實際操作中不要稱量組織，而直接根據(jù)目測結(jié)果加入RNAwait量，以加快操作和減少污染。例如5mm邊長的立方體組織塊，體積為125mm3=125μl，故應(yīng)當(dāng)加入1．25ml的RNAwait液。

2．  將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中。

3．  快速將較大的組織切成厚度<0．5 cm的任意片狀，較小的組織直接取下，立即完全浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0．5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較大的組織可以切成厚度<0．5 cm的任意片狀后保存，較小的組織（如大鼠的*、*，小鼠的大部分器官）則可以直接浸入RNAwait。

4．  將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑娣艜r間不能超過該溫度下的最長存放時間(請看技術(shù)指標(biāo))，如果要存放在-20℃或-80℃，需先將樣品在4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到*的溫度。注：將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前，需要棄掉保護(hù)液。

非凍型組織RNA保存液(RNAwait)注意事項：

1．組織和細(xì)胞取材速度要快，在獲取后應(yīng)當(dāng)盡快浸入RNAwait，以防止RNA降解。

2．冰凍組織不能用RNAwait保存，因為RNAwait不能有效滲入冰凍組織。

3．保存樣品的RNA提取：樣本從-20℃或-80℃冰箱取出后，復(fù)溫到室溫后，取出組織塊，再用于提取RNA。細(xì)胞樣本則復(fù)溫后低速離心收集細(xì)胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后繼的處理（如組織勻漿）可以在室溫下進(jìn)行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保護(hù)。殘留少量RNAwait保存液不影響后繼提取RNA的質(zhì)量。