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上海康朗生物科技有限公司
CEF雞胚成纖維細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國(guó)/美國(guó)
  • 貨號(hào):kl-CC338026
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-24
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 中國(guó)/美國(guó)
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號(hào) kl-CC338026
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 CEF
保質(zhì)期 12個(gè)月個(gè)月

CEF雞胚成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

CEF雞胚成纖維細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。

CEF雞胚成纖維細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

CEF雞胚成纖維細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

HTB-144 KL0331 胎盤絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞 JAR

FBM KL0332 胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞,FBM細(xì)胞

KL0333 塔賓曲霉 ACCC 30165

TC-jcyj0144 KL0334 宋氏志賀氏菌

KL0335 斯氏油脂酵母 CICC 1715

KL0336 絲狀鏈霉菌 ATCC19753

KL0337 水螺菌 ATCC49643

MV.1.Lu KL0338 水貂肺上皮細(xì)胞,MV.1.Lu細(xì)胞

KL0339 樹狀微桿菌 ATCC4358

K6H6/B5 KL0340 鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞,K6H6/B5細(xì)胞

L-MTK KL0341 鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株 L-MTK細(xì)胞

C8-D1A KL0342 鼠小腦細(xì)胞,C8-D1A細(xì)胞

WEHI 164 KL0343 鼠纖維肉瘤細(xì)胞系 WEHI 164細(xì)胞

B82 KL0344 鼠細(xì)胞系 B82細(xì)胞

TC-jcyj0135 KL0345 鼠傷寒沙門氏菌

MA-782 KL0346 鼠乳腺癌細(xì)胞系 MA-782細(xì)胞

S-180-S2D9 KL0347 鼠肉瘤細(xì)胞,S-180-S2D9細(xì)胞

CRIC100 KL0348 鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-Swiss細(xì)胞, 3T3-Swiss

STO KL0349 鼠胚成纖維細(xì)胞系 STO細(xì)胞

3T3-E1 KL0350 鼠胚成骨細(xì)胞,3T3-E1細(xì)胞

PT67 KL0351 鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞,PT67細(xì)胞

TC-jcyj0071 KL0352 鼠李糖乳桿菌

C2C12 KL0353 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞

B16-Fo KL0354 鼠黑色素瘤細(xì)胞系 B16-Fo細(xì)胞

SP2/0-Ag14 KL0355 鼠骨髓瘤細(xì)胞,SP2/0-Ag14細(xì)胞

CRIC093 KL0356 鼠骨髓瘤 J558L細(xì)胞, J558L

HSC-T6 KL0357 鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞

MM45T.Li KL0358 鼠肝癌細(xì)胞系 MM45T.Li細(xì)胞

H22-H8D8 KL0359 鼠肝癌細(xì)胞,H22-H8D8細(xì)胞

EAC-E2G8 KL0360 鼠腹水瘤 EAC-E2G8細(xì)胞

J774A.1 KL0361 鼠腹水單核細(xì)胞瘤 J774A.1細(xì)胞

GR KL0362 鼠成纖維細(xì)胞系 GR細(xì)胞

KL0363 噬糖鹽紅菌 ATCC29252

KL0364 嗜鹽細(xì)菌屬 DSMZ16465

 


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