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產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC337734 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | MCF-10A |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
LGZC021 KL1195 人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞,HKF細(xì)胞, HKF
U937 KL1196 人白血病細(xì)胞,U937細(xì)胞
SK KL1197 人白血病細(xì)胞,SK細(xì)胞
KG-1 KL1198 人白血病細(xì)胞,KG-1細(xì)胞
HL-60 KL1199 人白血病細(xì)胞,HL-60細(xì)胞
Daudi KL1200 人白血病細(xì)胞,Daudi細(xì)胞
K562/Adr KL1201 人白血病阿霉素耐藥株 K562/Adr細(xì)胞
HL-60/Ad KL1202 人白血病阿霉素耐藥株 HL-60/Ad細(xì)胞
SF-295 KL1203 人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SF-295細(xì)胞
Hurt-78 KL1204 人T細(xì)胞淋巴瘤 Hurt-78細(xì)胞
Hat-78 KL1205 人T細(xì)胞淋巴瘤 Hat-78細(xì)胞
T-CEM KL1206 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,T-CEM細(xì)胞
HuT 78 KL1207 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,HuT 78細(xì)胞
A3 KL1208 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,A3細(xì)胞
CASC012 KL1209 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,6T-CEM細(xì)胞, 6T-CEM
H9 KL1210 人T淋巴細(xì)胞系 H9細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1 KL1211 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
Hut78 KL1212 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,Hut78細(xì)胞
A3 KL1213 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,A3細(xì)胞
Molt-4 KL1214 人T淋巴細(xì)胞白血病,CD8+ Molt-4細(xì)胞
Jurkat D,E KL1215 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞
Hut-102 KL1216 人T淋巴瘤細(xì)胞系 Hut-102細(xì)胞
Jurkat77 KL1217 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系 Jurkat77細(xì)胞
hFOB 1.19 KL1218 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞,hFOB 1.19細(xì)胞
WI-38AV13 KL1219 人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞, WI-38AV13細(xì)胞
JRDC048 KL1220 人Ph+急淋白血病細(xì)胞系 SUP-B15細(xì)胞, SUP-B15
LOVO KL1221 人LOVO結(jié)腸癌細(xì)胞,LOVO細(xì)胞
Hela KL1222 人Hela細(xì)胞耐藥亞株(Hela/DDP) Hela細(xì)胞
CGM1 KL1223 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞,CGM1細(xì)胞
P3HR1 KL1224 人EBV陽性B淋巴瘤細(xì)胞,P3HR1細(xì)胞
BJAB KL1225 人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系 BJAB細(xì)胞
Romas KL1226 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,Romas細(xì)胞