產地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102186 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | NK-92 |
保質期 | 12個月個月 |
NK-92人自然殺傷細胞完全培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態:上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
NK-92人自然殺傷細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養基(養細胞時用什么培養基凍存時就用什么培養基):
⑴ 吸出舊培養液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
NK-92人自然殺傷細胞復蘇操作步驟如下:
1 將培養基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內;
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內有液氮進入,需擰松凍存管,排出內部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉移到已加入10ml培養液的離心管內;
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養;
4 次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養基繼續培養。
NK-92人自然殺傷細胞復蘇注意事項如下:
A.復蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應該檢查凍存管是否擰緊。取出復蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復蘇時需使用指定培養液。絕大多數細胞均無法立即適應不同基礎培養基或不同的血清種類,若因實驗需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養基組成,確定細胞適應后,方進行實驗。
C. 細胞復蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復。
D.細胞復蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經適宜。
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KLR2300 RDF-n 大鼠皮膚成纖維細胞 - 新生 Rat Dermal Fibroblasts - neonate 5 x 10^5 cells/vial
KLR2320 RDF-a 大鼠皮膚成纖維細胞-成年 Rat Dermal Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial
KLR2530 RLF 大鼠淋巴成纖維細胞 Rat Lymphatic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR3200 RPAEpiC 大鼠肺泡上皮細胞 Rat Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial
KLR3300 RPF 大鼠肺成纖維細胞 Rat Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR4100 RRTEpiC 大鼠腎小管上皮細胞 Rat Renal Tubular Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR4200 RRMC 大鼠腎系膜細胞 Rat Renal Mesangial Cells 5 x 10^5 cells per 1ml
KLR5300 RHSteC 大鼠肝星狀細胞 Rat Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR5340 RHMa 大鼠肝巨噬細胞 Rat Hepatic Macrophage 1x10^6 cells/vial
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KLR6200 RCM 大鼠心肌細胞 Rat Cardiac Myocytes 1 x 10^6 cells/vial
KLR6300 RCF 心肌成纖維細胞 Rat Cardiac Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial
KLR6550 RLEpiC 大鼠晶狀體上皮細胞 Rat Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
KLR7500 RMSC-bm 大鼠骨髓間充質干細胞 Rat Mesenchymal Stem Cells-bone marrow 5 x 10^5 cells/vial
KLR7540 RPMSC 大鼠肺間充質干細胞 Rat Pulmonary Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial
豬細胞系統
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KLP6510 PCEpiC 豬角膜上皮細胞 Porcine Corneal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial
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KLP6550 PLEpiC 豬晶狀體上皮細胞 Porcine Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial