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產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102179 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | pgsA-745 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
pgsA-745中國地鼠卵巢細(xì)胞-木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
pgsA-745中國地鼠卵巢細(xì)胞-木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長期保存。
pgsA-745中國地鼠卵巢細(xì)胞-木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
pgsA-745中國地鼠卵巢細(xì)胞-木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KL5801 STEMium 人胚胎干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml
KL5811 STEMium-XF 無異種人胚胎干細(xì)胞生長培養(yǎng)基 Xeno-free Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml
KL5881 MEF-cm 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 Mouse Embryonic Fibroblasts-Conditioned Medium 100 ml
KL5891 bFGF-std MEF-cm 堿性成纖維細(xì)胞生長因子刺激的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞條件培養(yǎng)基 bFGF-Stimulated Mouse Embryonic Fibroblasts Conditioned Medium 100ml
KL6511 CEpiCM 角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 Corneal Epithelial Cell Medium 500 ml
KL7311 OEpiCM 卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 Ovarian Epithelial Cell Medium 500 ml
KL7511 MSCM-sf 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 Mesenchymal Stem Cell Medium-serum free 500 ml
KL7611 MEpiCM 乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 Mammary Epithelial Cell Medium 500 ml
KL2121 KM-acf 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 Keratinocyte Medium-animal component free 500 ml
KL2321 FM-acf 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 Fibroblast Medium-animal component free 500 ml
KL5821 STEMium-ACF 人類多能干細(xì)胞培養(yǎng)基-無動(dòng)物組分 STEMium Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium-animal component free 500ml
KL7521 MSCM-acf 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 Mesenchymal Stem Cell Medium-animal component free 500 ml
KL09011 MEM MEM MEM with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml
KL09021 MEM MEM MEM with Hank's Salts and L-Glutamine 500 ml
KL09031 MEM MEM MEM with Eagles's Salts and Glutamine 500 ml
KL09111 M199E M199E Medium 199 with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml
KL09121 M199H M199H Medium 199 with Hanks Salts and L-Glutamine 500 ml
KL09211 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml
KL09221 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml
KL09221-1L DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 1L