產地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102178 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | Sf9 |
保質期 | 12個月個月 |
Sf9草地夜蛾卵巢細胞完全培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態:上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
Sf9草地夜蛾卵巢細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養基(養細胞時用什么培養基凍存時就用什么培養基):
⑴ 吸出舊培養液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
Sf9草地夜蛾卵巢細胞復蘇操作步驟如下:
1 將培養基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內;
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內有液氮進入,需擰松凍存管,排出內部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉移到已加入10ml培養液的離心管內;
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養;
4 次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養基繼續培養。
Sf9草地夜蛾卵巢細胞復蘇注意事項如下:
A.復蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應該檢查凍存管是否擰緊。取出復蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復蘇時需使用指定培養液。絕大多數細胞均無法立即適應不同基礎培養基或不同的血清種類,若因實驗需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養基組成,確定細胞適應后,方進行實驗。
C. 細胞復蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復。
D.細胞復蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經適宜。
KL09231 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml
KL09241 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml
KL09251 -1L DMEM-prf DMEM-prf DMEM with High Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate - phenol red-free 1L
KL09311 Ham's F-10 Ham's F-10 F-10 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09321 Ham's F-12 Ham's F-12 F-12 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09411 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine 500 ml
KL09421 DMEM/F-12 DMEM/F-12 DMEM/F-12 with L-Glutamine and 15 mM HEPES 500 ml
KL09511 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 without L-Glutamine - with 25 mM HEPES 500 ml
KL09521 RPMI 1640 RPMI 1640 RPMI 1640 with L-Glutamine and 25 mM HEPES 500 ml
KL09611 IMDM IMDM MDM with L-Glutamine and 25 mM HEPES; without alpha-Thioglycerol - 2-mercaptoethanol 500 ml
KL102-01 rhSCF 重組人干細胞因子 Recombinant Human Stem Cell Factor 2μg
KL102-02 rhG-CSF 重組人粒細胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor 2μg
KL102-03 rhGM-CSF 重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子 Recombinant Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 5μg
KL102-09 rhM-CSF 重組人巨噬細胞集落刺激因子 Recombinant Human Macrophage Colony Stimulating Factor 2μg
KL103-01 rhTNF-α 重組人腫瘤壞死因子-α Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha 10μg