產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC102130 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | MPK |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
MPK小型豬腎細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
MPK小型豬腎細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
MPK小型豬腎細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
MPK小型豬腎細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3100 人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 TT
KLC3101 人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 SW579 [SW 579; SW-579]
KLC3102 人食管癌細(xì)胞 TE-1
KLC3103 人胃癌細(xì)胞 NCI-N87 [N87]
KLC3104 人胃癌細(xì)胞 MGC80-3
KLC3105 人胃癌細(xì)胞(未分化) HGC-27
KLC3106 人胃腺癌細(xì)胞 AGS
KLC3107 人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901
KLC3108 人胃腺癌細(xì)胞(低分化) BGC-823
KLC3109 人肝癌細(xì)胞 BEL-7402
KLC3110 人肝癌細(xì)胞 BEL-7404
KLC3111 人肝癌細(xì)胞 Hep 3B2.1-7
KLC3112 人肝癌細(xì)胞 Hep G2
KLC3113 人肝癌細(xì)胞 SK-HEP-1
KLC3114 人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721
KLC3115 人肝癌亞力山大細(xì)胞 PLC/PRF/5
KLC3116 人肝癌細(xì)胞 Li-7
KLC3117 人肝癌細(xì)胞 HuH-7
KLC3118 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 HuH-6
KLC3119 人肝膽管癌細(xì)胞 RBE
KLC3120 人胚肺細(xì)胞 MRC-5
KLC3121 人胚肺細(xì)胞 WI-38
KLC3122 人肝永生化細(xì)胞 THLE-3
KLC3123 人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞 HCCC-9810
KLC3124 人膽囊癌細(xì)胞 GBC-SD
KLC3125 人*癌細(xì)胞 CFPAC-1
KLC3126 人*癌細(xì)胞 PANC-1
KLC3127 人*癌細(xì)胞系 SW 1990
KLC3128 人原位*腺癌細(xì)胞 BxPC-3
KLC3129 人轉(zhuǎn)移*腺癌細(xì)胞 AsPC-1
KLC3130 人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO 205