產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC102123 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | VEROE6 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
VEROE6非洲綠猴腎細胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
VEROE6非洲綠猴腎細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
VEROE6非洲綠猴腎細胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
VEROE6非洲綠猴腎細胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌氁跃徛壤凉u次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行實驗。
C. 細胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復(fù)。
D.細胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3297 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 U-373MG
KLC3298 人肝癌細胞 Hep3B
KLC3299 人正常肝細胞 HL-7702
KLC3300 小鼠單核細胞白血病細胞 Raw-Blue
KLC3301 人胚腎細胞 293-mTLR5
KLC3302 人骨髓瘤細胞 U266
KLC3303 人膀胱癌細胞 EJ
KLC3304 肝卵圓細胞 HOC
KLC3305 人舌鱗癌細胞 CAL 27
KLC3306 人食管癌細胞 Eca-109
KLC3307 小鼠Lewis肺癌細胞 LLC1[LL/2]
KLC3308 人肺癌細胞 PC9
KLC3309 人肺癌細胞 PC14
KLC3310 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 HUVEC[HUV-EC-C]
KLC3311 DADY
KLC3312 昆蟲卵巢細胞 Sf9
KLC3313 大鼠乳腺癌細胞 MADB-106
KLC3314 豬腎上皮細胞 PK(15)
KLC3315 狗腎上皮細胞 MDCK[NBL-2]
KLC3316 豬肺泡巨噬細胞 3D4/21
KLC3317 猴胚胎腎上皮細胞 marc-145
KLC3318 人冠狀動脈內(nèi)皮細胞 HCAEC
KLC3319 豬骨髓間質(zhì)干細胞 Pig MSC
KLC3320 R5
KLC3321 S8
KLC3322 Panc O2
KLC3323 人非小細胞肺癌細胞 H322
KLC3324 人鼻咽癌細胞 CNE
KLC3325 人食管癌細胞 EC9706
KLC3326 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝 293LVT
KLC3327 人非小細胞肺癌細胞 H1650-M3
KLC3328 人非小細胞肺癌細胞 H1299