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WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞
  • 品牌:KALANG/進(jìn)口品牌
  • 產(chǎn)地:中國/美國
  • 貨號:kl-CC102121
  • 發(fā)布日期: 2016-03-17
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 中國/美國
品牌 KALANG/進(jìn)口品牌
貨號 kl-CC102121
保存條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
英文名稱 WCH-17
保質(zhì)期 12個月個月

WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

細(xì)胞生長:貼壁生長

細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形

細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3

WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):

吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次

胰酶消化

加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止

離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)

吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。

WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:

1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);

2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);

3 1,000 rpm下離心510分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);

4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

WCH-17土撥鼠肝細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:

A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。

B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。

D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。

KLC3361 人結(jié)腸癌細(xì)胞 SW620-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3362 人原位*腺癌細(xì)胞 BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3363 倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3364 人肺癌細(xì)胞 PC9-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3365 S8-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3366 豬腎上皮細(xì)胞 PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3367 狗腎上皮細(xì)胞 MDCK-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3368 猴胚胎腎上皮細(xì)胞 marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3369 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3370 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3371 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 F98-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3372 人宮頸癌細(xì)胞 Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3373 大鼠乳腺癌細(xì)胞 MADB-106-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3374 人肺癌細(xì)胞 A549-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3375 人肝癌細(xì)胞 97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3376 人肝癌細(xì)胞 97H-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3377 人胚腎細(xì)胞 293XL-hTLR7

KLC3378 人胚腎細(xì)胞 293XL-hTLR9

KLC3379 人腎癌細(xì)胞 A498-EGFP-puro

KLC3380 小鼠成纖維細(xì)胞 L929-EGFP-puro

KLC3381 人胃癌細(xì)胞 BGC-823-EGFP-puro

KLC3382 小鼠肝癌細(xì)胞 Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)

KLC3383 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9-EGFP-puro

KLC3384 小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC-RFP-puro

KLC3385 人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5-EGFP+puro

KLC3386 人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 OS-EGFP+puro

KLC3387 人肝癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移) MHCC-97H

KLC3388 人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L

KLC3389 微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs

KLC3390 多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系 MES23.5

KLC3391 人骨肉瘤細(xì)胞 HOS

KLC3392 小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12

KLC3393 非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞 MA104

KLC3394 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H226

KLC3395 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MCA38

 


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