產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC102107 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | 2011124L |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
2011124L北松鼠肺成纖維樣細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
2011124L北松鼠肺成纖維樣細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
2011124L北松鼠肺成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
2011124L北松鼠肺成纖維樣細(xì)胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌氁跃徛壤凉u次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
KLC3680小鼠淋巴成纖維細(xì)胞MLF
KLC3681小鼠腎小管上皮細(xì)胞MRTEpiC
KLC3682小鼠腎系膜細(xì)胞MRMC
KLC3683小鼠肝星狀細(xì)胞MHSteC
KLC3684小鼠心肌細(xì)胞MCM
KLC3685小鼠心臟成纖維細(xì)胞MCF
KLC3686小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMSC-bm
KLC3687小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF
KLC3689
KLC3690CD57BL/6小鼠細(xì)胞
KLC3691小鼠腦膜細(xì)胞MMC
KLC3692小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r
KLC3693小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c
KLC3694小鼠顆粒細(xì)胞MGC
KLC3695小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h
KLC3696小鼠腹脊髓神經(jīng)元MN-vsc
KLC3697小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc]
KLC3698小鼠腹脊髓神經(jīng)元MN-vsc
KLC3699小鼠雪旺細(xì)胞MSC
KLC3700小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞MA
KLC3701小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-c
KLC3702小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-h
KLC3703小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-sc
KLC3704小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞MM
KLC3705小鼠巨噬細(xì)胞MMa-bm
KLC3706小鼠淋巴成纖維細(xì)胞MLF
KLC3707小鼠唾腺成纖維細(xì)胞MSGF
KLC3708小鼠肺成纖維細(xì)胞MPF
KLC3709小鼠腎小管上皮細(xì)胞MRTEpiC
KLC3710小鼠腎系膜細(xì)胞MRMC
KLC3711小鼠心肌細(xì)胞MCM
KLC3712小鼠心臟成纖維細(xì)胞MCF
KLC3713小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMSC-bm
KLC3714小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF-mt