產地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC101364 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | HES3.3 |
保質期 | 12個月個月 |
HES3.3人胚胎干細胞完全培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態:上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
HES3.3人胚胎干細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養基(養細胞時用什么培養基凍存時就用什么培養基):
⑴ 吸出舊培養液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
HES3.3人胚胎干細胞復蘇操作步驟如下:
1 將培養基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內;
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內有液氮進入,需擰松凍存管,排出內部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉移到已加入10ml培養液的離心管內;
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養;
4 次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養基繼續培養。
HES3.3人胚胎干細胞復蘇注意事項如下:
A.復蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應該檢查凍存管是否擰緊。取出復蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復蘇時需使用指定培養液。絕大多數細胞均無法立即適應不同基礎培養基或不同的血清種類,若因實驗需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養基組成,確定細胞適應后,方進行實驗。
C. 細胞復蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復。
D.細胞復蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經適宜。
CASC199 KL1561 袋鼠腎細胞,Pt K1 (NBL-3)細胞, Pt K1 (NBL-3)
HTB-183 KL1562 大細胞肺癌細胞,NCI-H661細胞 NCI-H661
CRL-1476 KL1563 大鼠主動脈血管平滑肌細胞,A10細胞 A10
RSMC KL1564 大鼠主動脈平滑肌細胞,RSMC細胞
SVAREC KL1565 大鼠主動脈內皮細胞,SVAREC細胞
BRL3A KL1566 大鼠正常肝細胞,BRL3A細胞
AR42J KL1567 大鼠*外分泌腺腫瘤細胞,AR42J細胞
DSL-6A/C1 KL1568 大鼠*癌細胞,DSL-6A/C1細胞
INS-1 KL1569 大鼠胰島素細胞,INS-1細胞
USMC KL1570 大鼠血管平滑肌細胞,USMC細胞
CASC215 KL1571 大鼠雪旺細胞,RSC96細胞, RSC96
VSMC KL1572 大鼠胸主動脈平滑肌細胞,ATCC:A10 VSMC細胞
CASC022 KL1573 大鼠胸大動脈平滑肌細胞,A7r5細胞, A7r5
JRDC051 KL1574 大鼠心肌細胞,H9c2(2-1)細胞, H9c2(2-1)
IEC-6 KL1575 大鼠小腸隱窩上皮細胞,IEC-6細胞
CASC205 KL1576 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞, RBL-2H3
RBL-1 KL1577 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞,RBL-1細胞
CRIC091 KL1578 大鼠嗜鉻細胞瘤 PC-12細胞, PC-12
HBZY-1 KL1579 大鼠腎小球系膜細胞EC (HBZY-1) HBZY-1細胞
LGZC188 KL1580 大鼠腎小球系膜細胞,HBZY-1細胞, HBZY-1
NRK KL1581 大鼠腎小管上皮細胞,ATCC:CRL-6509 NRK細胞
NRK KL1582 大鼠腎細胞,NRK細胞
NRK-52E KL1583 大鼠腎細胞,NRK-52E細胞
PC-12 KL1584 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化) PC-12細胞
PC12 KL1585 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞,PC12細胞
NRK-49F KL1586 大鼠腎成纖微細胞,NRK-49F細胞
C6 KL1587 大鼠神經膠質瘤細胞,C6細胞
MADB106 KL1588 大鼠乳腺腺癌細胞系 MADB106細胞
CASC222 KL1589 大鼠乳腺癌細胞,SHZ-88細胞, SHZ-88
MADB-106 KL1590 大鼠乳腺癌細胞,MADB-106細胞
WK256 KL1591 大鼠肉瘤細胞,WK256細胞
RTE KL1592 大鼠氣管上皮細胞,RTE細胞
RN-c KL1593 大鼠皮層神經元細胞,RN-c細胞