ELISA實驗中各種方法原理及優缺點比較（超詳細，版主多年經驗總結）

 ELISE實驗是指酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay)指在固定相上進行免疫酶技術，其依據有1：蛋白質可以吸附到固定相上而不改變其活性，2：抗原或抗體與酶交聯以后仍可保持其活性及酶的催化活性，3：交聯后的酶可以與反應底物進行反應，并催化其分解，產生有色物質。根據有色物質的多少，即顏色的深淺，通過酶標儀測定其顏色與標準物質顏色的差異，根據酶測曲線得出其濃度。 ELISE實驗基本類型有直接法、間接法、抗體夾心法、競爭法、抑制法。 現將各種方法原理及優缺點總結如下： 一：直接法 直接法利用抗原結合在固定相上面，用酶聯抗體直接與抗原結合，而后分解底物。 二：間接法 間接法利用抗原與固定相結合后，用一抗與抗原結合，再用二抗V區和一抗S區結合。酶聯抗體位于二抗上。由于一抗V區具有穩定性，S區具有可變性，所以在與不同抗原結合時，
V區變化而S區不變，故間接法可以測定 三：雙抗夾心法 利用抗體錨定在固定相上，抗原與其結合后，抗原的另外一個表位與酶聯抗體結合，催化底物分解，故雙抗夾心法適用于某些大TMB wash wash wash 分子的具有至少雙表位的抗原 四：競爭法 競爭法是指針對抗原上同一抗原表位，分別用抗體與酶聯抗體先后與其結合，抗體占據表位后，酶聯抗體不能再與抗原結合而被洗滌液沖走，故催化底物反應的能力相應下降。此法適應于小分子或只有一個抗原表位或重復抗原表位的抗原。