免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。想要在做完實驗評判結果,我司教您三種簡單易懂方法,方便快捷,一起跟隨小編去看看吧!
(1)陽性著色細胞計數法。在40*光鏡下,隨機選擇不重疊的10個視野,人工或機器計數陽性著色細胞,每組3~6張不同動物組織切片,然后進行組間比較即可。
(2)灰密度分析法。通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區域、相同條件下用image j進行灰密度分析,然后進行統計分析即可。
(3)評分法。通過在光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進行評分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),最終可以分數相加,再進行比較。
對于以上這幾種方法,各有利弊,請細心選擇。要想得到正確結果的前提是您要做出著色均勻、背景很淺的高質量切片。