ELISA試劑盒的蛋白質局部濃縮
ELISA試劑盒蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。
為您詳解樣品的各步操作方法:
A、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
B、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。
C、血清:操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原的試管,收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
D、組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。
E、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍,盡可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
可用作ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、ELISA試劑盒收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。