RNA干擾沉默同源異型基因A5逆轉(zhuǎn)K562/ADM細(xì)胞耐藥性的研究

目的研究RNA干擾(RNAi)技術(shù)沉默同源異型基因A5(HOXA5)對(duì)白血病耐阿霉素細(xì)胞株K562/ADM細(xì)胞耐藥性的影響并探討其機(jī)制。方法 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中HOXA5、p38和p-p38的蛋白表達(dá),q RT-PCR檢測(cè)HOXA5、p38的m RNA表達(dá);CCK8檢測(cè)各組細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性變化;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)各組細(xì)胞的凋亡及周期變化。結(jié)果 K562/ADM細(xì)胞中HOXA5基因的表達(dá)高于K562細(xì)胞,且其耐藥性是K562細(xì)胞的4.94倍。轉(zhuǎn)染后實(shí)驗(yàn)組K562/ADM細(xì)胞中HOXA5基因的表達(dá)受抑制,而實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的IC50較對(duì)照組降低2.55倍。同時(shí),實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中p38的m RNA及p-p38的蛋白表達(dá)高于對(duì)照組。與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞周期G0/G1期增高,S期降低。經(jīng)ADM(2.5μg/ml)誘導(dǎo)后,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組。結(jié)論 RNAi沉默HOXA5能在一定程度上逆轉(zhuǎn)白血病耐藥,其機(jī)制可能與p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活有關(guān)。